ICP-MS na bancada
O padrão interno perdeu sinal, mas o software ainda entregou uma concentração. Você liberaria o resultado?
Em espectrometria de massas com plasma indutivamente acoplado, ou ICP-MS, o software pode calcular uma concentração mesmo quando a resposta do padrão interno se afasta daquela observada na calibração. É nesse momento que vale voltar às intensidades brutas. A queda ocorreu em uma única amostra, se estendeu ao longo da sequência ou afetou apenas um dos padrões internos? Cada comportamento sugere um caminho de investigação. [1] [2]
O que a padronização interna corrige
Na padronização interna, a intensidade do analito é avaliada em relação à de um isótopo de referência. No método EPA 200.8, os padrões internos são introduzidos no mesmo nível em amostras, soluções de calibração e brancos. A adição pode ser feita diretamente às soluções ou em linha, antes da nebulização. [1]
A lógica da correção
Resposta normalizada = intensidade do analito ÷ intensidade do padrão interno associado
Se os dois sinais caem na mesma proporção, a razão pode permanecer estável. É assim que a padronização interna compensa uma variação compartilhada. Se o padrão interno perde proporcionalmente mais sinal que o analito, a razão aumenta e a concentração pode ser superestimada. Mesmo quando a razão se mantém, uma queda acentuada nas intensidades pode comprometer a sensibilidade da medição. [2]
A queda acompanha a amostra ou a sequência?
Diferenças de viscosidade e tensão superficial podem alterar a nebulização e o transporte da amostra. A composição da matriz também pode afetar a transmissão dos íons e suprimir ou aumentar o sinal. Já o acúmulo de sólidos no nebulizador ou na interface pode reduzir o desempenho do instrumento ao longo da sequência. Como esses efeitos podem produzir desvios semelhantes, o sinal do padrão interno orienta a investigação, mas raramente identifica a causa sozinho. [2]
Como interpretar o sinal
01. O sinal cai na amostra e volta ao esperado no branco de calibração.
O efeito de matriz ganha força como hipótese. Quando previstas no método, a diluição e a reanálise ajudam a verificar se o desvio diminui.
02. O sinal permanece baixo no branco de calibração.
A investigação se volta para o sistema. Depósitos, obstruções parciais na interface e mudanças nas condições de ajuste instrumental estão entre as possibilidades.
03. Apenas um padrão interno apresenta sinal elevado.
Verifique se a própria amostra contribui com o isótopo monitorado, se há interferência nessa massa ou se ocorreu erro na adição do padrão.
A interpretação deve considerar o comportamento dos brancos, dos controles e dos demais padrões internos ao longo da sequência. [1] [2]
Massa próxima ajuda. Resposta semelhante sustenta a correção.
A proximidade de massa entre o analito e o padrão interno é uma orientação do método EPA 6020B. O ponto decisivo é verificar se os dois respondem de maneira semelhante às variações da matriz nas condições de análise. Também é preciso avaliar se o isótopo escolhido já está presente na amostra em quantidade relevante. Uma contribuição adicional nessa massa pode elevar o denominador da razão e subestimar o resultado do analito. [2]
O critério de aceitação pertence ao método
EPA 200.8, revisão 5.4, seção 9.4.5
A resposta de cada padrão interno deve permanecer entre 60% e 125% da resposta original no branco de calibração. [1]
EPA 6020B, revisão 2, seção 9.10
A seção prevê investigação quando a intensidade fica abaixo de 30% da intensidade observada na calibração inicial. Esse percentual se refere ao sinal remanescente e corresponde a uma queda superior a 70%. [2]
Cada método define a referência de comparação e as ações a tomar diante de um desvio. Ao revisar uma sequência, confira qual referência foi usada pelo software e se os critérios configurados correspondem ao procedimento em uso. [1] [2]
Na análise de metais dissolvidos, totais ou recuperáveis, o preparo define a fração que chega ao instrumento. O padrão interno ajuda a avaliar a confiabilidade da medição dessa fração. Na revisão do lote, a concentração calculada merece ser lida junto com o sinal que sustentou sua correção.
Referências
- U.S. Environmental Protection Agency.
Method 200.8, revisão 5.4, 1994. Seções 9.4.5 e 10.3, monitoramento da resposta e padronização interna. - U.S. Environmental Protection Agency.
SW-846 Method 6020B, revisão 2, 2014. Seções 1.5, 4.0, 7.21 e 9.10, seleção dos padrões internos, interferências e investigação de desvios.