Seção Microbiologia | Complexo Burkholderia Cepacia
Nos anos de 2019 e 2020 tivemos a notícia de recall de alguns produtos farmacêuticos devido a uma possível contaminação microbiana.
Os microrganismos responsáveis pela contaminação foram a Burkholderia cepacia e a Ralstonia pickettii sendo que este último microrganismo foi abordado no artigo anterior .
Ambas as espécies compartilham certas características relevantes, desde a sua capacidade de proliferar em ambientes úmidos além de diversas fontes de água e pela capacidade de infectar pacientes imunocomprometidos.
Anteriormente eram classificados como pertencentes ao gênero Pseudomonas , sendo que a B. cepacia era conhecida como Pseudomonas cepacia e a R. pickettii era conhecida como a Pseudomonas pickettii , sendo depois classificado como Burkholderia pickettii e agora classificado como Ralstonia pickettii.
Este artigo analisa brevemente o complexo de Burkholderia cepacia e o risco que ele representa para pacientes vulneráveis, antes de discutir os métodos de teste e a qualificação do método.
Na prática médica, esses microrganismos aparecem com maior frequência em pacientes com fibrose cística devido a capacidade destes microrganismos em formar biofilmes.
O primeiro passo na formação do biofilme é a adesão das bactérias à uma superfície e ocorre de forma aleatória. Esta primeira adesão é reversível e é mantida por interações físico-químicas não específicas constituindo o alicerce para o crescimento do biofilme A segunda fase da adesão consiste na transição do estágio reversível para o irreversível As bactérias passam a secretar substâncias que serão responsáveis pela manutenção da adesão e da camada que envolve o biofilme. Nesta fase há o início da formação de microcolônias e do desenvolvimento da arquitetura do biofilme maduro . Os biofilmes maduros apresentam estrutura semelhante a cogumelos, que são envoltos por diversas substâncias, principalmente açúcares e rodeados por poros e canais de água que funcionam como um sistema de troca de nutrientes, oxigênio e metabólitos que precisam ser secretados para fora do biofilme A quinta e última fase da formação do biofilme ocorre quando o ambiente não é mais favorável à sua manutenção, e consiste no descolamento do biofilme maduro em forma de agregados celulares ou células livres Após desprendidas, as bactérias livres podem colonizar novos ambientes, reiniciando a formação de novos biofilmes.
Os biofilmes não estão presentes somente nos dentes. Qualquer bactéria pode formar biofilme, inclusive dentro de nosso organismo. Eliminar colônias de biofilmes em seres humanos é quase impossível, porém eliminar os mesmos microrganismos em tubulação de água das indústrias farmacêuticas, cosméticas é mais factível.
O F.D.A. recentemente alertou sobre a necessidade de se testar a presença deste microrganismo no ambiente, na água e nas matérias primas e produtos acabados devido a uma série de recalls envolvendo o complexo BCC.
No centro dessa discussão está o novo método oficializado pela Farmacopeia Americana (USP 43)
A Burokholderia cepacia ,tem o potencial de crescer em conservantes e antissépticos, e crescer em produtos líquidos orais e tópicos.
O capítulo tem o objetivo de estabelecer se uma matéria prima ou produto atende com uma especificação para a ausência do microrganismo , especialmente aqueles para uso em inalação, uso oral, mucosa oral, cutânea, ou nasal para os pacientes de alto risco.
Conforme a proposição deve-se realizar testes de promoção de crescimento com as seguintes cepas; Burkholderia cepacia ATCC 25416, Burkholderia cenocepacia ATCC BAA-245, Burkholderia multivorans ATCC BAA-247 , Staphylococcus aureus ATCC 6538 e a Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027.
As amostras diluídas devem ser inoculadas em Caldo de Soja Caseína e a seleção e subcultura devem ser semeadas em Burkholderia cepacia seletive agar e incubados a 30-35°C durante 18 a 72 horas. A presença da Burkholderia é evidenciada pelo crescimento de colônias verde a marro com halo amarelado ou de colônias brancas com uma zona rosa avermelhada no meio de cultura, que devem ser confirmados por meios bioquímicos . A ausência do microrganismo ´confirmada pelo não crescimento ou os testes confirmatórios d identificação forem negativos.
Referencias Bibliográficas:
Farmacopeia dos Estados Unidos da América, USP 43 〈60〉 MICROBIOLOGICAL EXAMINATION OF NONSTERILE PRODUCTS TESTS FOR BURKHOLDERIA CEPACIA COMPLEX
Autor: Claudio kiyoshi hirai
